Basiese inleiding
Eritrosietlysaat is een van die eenvoudigste en maklikste metodes om rooibloedselle te verwyder, dit wil sê om rooibloedselle met lysaat te verdeel, wat nie kernselle beskadig nie en rooibloedselle volledig kan verwyder. Lysaat-splyting is 'n ligte rooibloedselle-verwyderingsmetode, wat hoofsaaklik gebruik word vir die skeiding en suiwering van weefselselle wat deur ensiemvertering versprei word, die skeiding en suiwering van limfosiete, en die verwydering van rooibloedselle in die eksperimente van weefselproteïen en nukleïen suur onttrekking. Die weefselselle wat deur die lysaat van rooibloedselle verkry word, bevat nie rooibloedselle nie, en kan verder gebruik word vir primêre kultuur, selsamesmelting, vloeisitometrie, skeiding en ekstraksie van nukleïensuur en proteïen, ens.
Aanwysings
Weefselselmonster
1. Vars weefsels is deur pankreas/ensiem of kollageenase verteer en in enkelselsuspensie gedispergeer, en die supernatant is weggegooi deur sentrifugering.
2. Neem ELS-lisaat uit die yskas by 4â, voeg ELS-lisaat by selpresipitaat in 'n verhouding van 1:3-5 (voeg 3-5ml lisaat by 1ml sel gekompakteer), blaas liggies en meng.
3. Sentrifugeer by 800-1000rpm vir 5-8 minute en gooi die boonste rooi helder vloeistof weg.
4. Die gepresipiteerde deel is versamel en gesentrifugeer met Hank se oplossing of serumvrye kultuuroplossing vir 2-3 keer.
5, as die krake nie volledig/volledig is nie, kan stappe 2 en 3 herhaal word.
6. Hersuspensie selle vir daaropvolgende eksperimente; As RNA onttrek word, is dit die beste om dit te doen in die oplossing wat van Stap 4 voorberei is met DEPC-water
Rooibloedselle het 'n baie kort lewensiklus, slegs 120 dae, maar hulle reproduseer bloed baie vinnig, en in hierdie geval is hulle besonder in staat tot seldeling, en hulle is die selle wat die vinnigste deel van almal, so hierdie sel is baie waardevol, dus is dit baie nuttig vir selkultuur. Dit is baie eenvoudig, dit het geen organelle in nie, net selmembrane en proteïene.